Perché è necessario effettuare test genetici dopo l'immunoistochimica?

Perché è necessario effettuare test genetici dopo l'immunoistochimica?

Sebbene siano attualmente disponibili numerosi metodi di rilevamento, come l'immunoistochimica (IHC), l'ibridazione fluorescente in situ (FISH), il sequenziamento diretto, la reazione a catena della polimerasi in tempo reale (PCR), la cromatografia liquida ad alte prestazioni denaturante (DHPLC), la spettrometria di massa a tempo di volo con desorbimento/ionizzazione laser assistita da matrice (MALDI-TOF) e il sequenziamento di nuova generazione (NGS), i metodi più comunemente utilizzati nel cancro al polmone sono l'IHC e l'NGS. Quindi, qual è la differenza tra i due? Perché non solo uno dei test?

IHC vs. NGS: chi è il "supereroe" nel mondo dei test?

Innanzitutto, da un punto di vista metodologico, l'IHC è come un cecchino, che localizza con precisione antigeni specifici nei tessuti o nelle cellule sulla base di anticorpi antigenici. L'NGS è più simile a un detective, che determina la sequenza del DNA catturando i marcatori speciali (solitamente marcatori molecolari fluorescenti) trasportati dalle basi appena aggiunte durante la replicazione del DNA.

In termini di target di rilevamento, rispetto all'NGS, l'IHC può rilevare meno target e può rilevare solo alcune mutazioni genetiche (come la traslocazione di ALK, la sovraespressione di MET) o la sovraespressione del ligando di morte programmata-1 (PD-L1). Tuttavia, oltre ai siti sopra menzionati, la NGS può rilevare mutazioni anche in molti altri siti, come BRAF, ROS1, NTRK1, MET, KRAS, HER-2 e FGFR3. I tipi di mutazioni includono mutazioni puntiformi, amplificazioni, fusioni, ecc.

Importanza delle linee guida cliniche: quale "mappa di battaglia" è più dettagliata?

I marcatori rilevati dall'IHC possono guidare la classificazione patologica specifica del cancro al polmone nella pratica clinica di routine (come TTF-1, Napsin A, CK5/6, P63 e P40, ecc.). Oltre a coprire una gamma più ampia di variazioni genetiche, la tecnologia NGS viene utilizzata anche per descrivere la portata e il tipo di differenze che si verificano nei tumori e nel loro microambiente. Ad esempio, il test TMB ha un certo potenziale predittivo per la risposta agli inibitori dei checkpoint immunitari. La "mappa di battaglia" dell'NGS è più dettagliata e può aiutare i medici a sviluppare piani di trattamento più accurati.

Riepilogo: IHC e NGS sono indispensabili!

In generale, l'IHC è un test a livello di espressione proteica, mentre l'NGS è un test a livello genico. Le due cose si completano e si verificano a vicenda. Pertanto, dopo l'IHC, sono necessari ulteriori test genetici.

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