Epidemiologia, caratteristiche cliniche, tecniche diagnostiche e misure di prevenzione e controllo dell'infezione da parvovirus dell'oca

1 Epidemiologia

patogeno. Il parvovirus dell'oca (GPV) appartiene alla famiglia dei Parvoviridae e al genere Parvovirus. Le sue caratteristiche biologiche sono simili a quelle del parvovirus dell'anatra muscovy. La microscopia elettronica ha rivelato che le particelle del virus sono rotonde o esagonali, disposte in un reticolo simmetrico icosaedrico, con un diametro di circa 20-24 nm. Non ha capsula ed è un virus a DNA. Poiché il virus non ha un involucro, ha una forte capacità di resistere all'ambiente. Ad esempio, verrà inattivato dopo essere stato riscaldato a 56°C per 3 ore ed è insensibile alla tripsina, ai detergenti e alle condizioni di basso pH.

Animali sensibili. In condizioni di infezione naturale, solo i paperi e gli anatroccoli di razza Muscovy possono contrarre l'infezione, mentre altri uccelli e mammiferi non vengono infettati. Le oche giovani tra i 3 e i 20 giorni sono suscettibili e ci sono alcune differenze nei tassi di incidenza e mortalità tra oche di età diverse, con diverse condizioni immunitarie e in diverse regioni, ma più precoce è l'età della malattia, maggiore è il tasso di mortalità.

Vie di trasmissione. La malattia si trasmette principalmente per via oro-fecale, ovvero la principale via di trasmissione della malattia è il contatto diretto con oche malate o la trasmissione meccanica tramite mangimi, utensili, uova da riproduzione, ecc. contaminati dal virus.

2 Sintomi clinici e alterazioni autoptiche 2.1 Sintomi clinici Per i paperi di età inferiore ai 15 giorni, infettati naturalmente o artificialmente, il periodo di incubazione è solitamente compreso tra 3 e 5 giorni; per i paperotti sensibili di età superiore ai 15 giorni, infettati naturalmente o artificialmente, il periodo di incubazione è da 1 a 2 giorni più lungo del precedente.

La malattia provoca sintomi principalmente a livello dell'apparato digerente e nervoso delle oche malate. A seconda della durata della malattia, questa può essere suddivisa in tre tipi: il tipo più acuto, il tipo acuto e il tipo subacuto.

Il tipo più acuto. La malattia è più comune nei paperi di età inferiore ai 7 giorni, che spesso si sviluppano all'improvviso e muoiono rapidamente. Di solito diventano deboli entro poche ore dall'inizio della depressione, oppure cadono a terra agitando le gambe e muoiono rapidamente. Inoltre, i paperotti malati presentano una piccola quantità di secrezioni sierose nelle narici, che possono diffondersi all'intero gregge nel giro di pochi giorni.

Tipo acuto. È più comune nei paperotti di età compresa tra 7 e 14 giorni. Dopo essersi ammalati, i sintomi principali sono depressione, perdita di appetito o addirittura insonnia totale. Dopo circa 12 ore, le oche malate appaiono spesso intorpidite, con il collo retratto e gli occhi chiusi, e si muovono lentamente e debolmente. Non sono in grado di stare in piedi in modo stabile e spesso si accovacciano. Smettono di mangiare, ma bevono più acqua ed espellono feci molli di colore giallo-verde o giallo-bianco, con le feci attaccate all'ano. Inoltre, le oche malate respirano a bocca aperta, le loro narici sono sporche, i loro becchi sono cianotici, le loro zampe palmate sono di colore opaco, il loro gozzo diventa morbido e contiene liquidi e bolle, i loro corpi si disidratano, la loro congiuntiva diventa secca e alla fine muoiono di shock. Prima di morire, soffrono di convulsioni o paralisi delle gambe e il decorso della malattia dura solitamente circa 2 giorni.

Tipo subacuto. Di solito si manifesta nella fase avanzata di un'epidemia ed è più probabile che colpisca i paperi di età superiore ai 14 giorni. Dopo essersi ammalati, manifestano apatia, riduzione o cessazione dell'alimentazione, secrezioni nelle narici, movimenti lenti, incapacità di stare in piedi in modo stabile, spesso si accovacciano, il tutto accompagnato da diarrea e feci che contaminano la zona attorno all'ano. Il decorso della malattia dura leggermente più a lungo, solitamente dai 3 ai 7 giorni o più, e può guarire spontaneamente.

2.2 I cambiamenti osservati durante l'autopsia sono principalmente lesioni intestinali, vale a dire, tutti i segmenti dell'intestino tenue sono congestionati e gravemente gonfi, con una grande quantità di muco, una piccola quantità di essudato di cellulosa giallo-bianco simile a gocce d'uovo sulla mucosa e uno strato di pseudomembrana giallo chiaro che ricopre i segmenti intestinali medio e inferiore. Talvolta si possono osservare sottili strisce di coagulanti, che conferiscono all'intestino tenue una lesione "a salsiccia".

Il tipo più acuto. L'autopsia ha mostrato che la mucosa duodenale era diffusamente arrossata a causa della congestione e che sulla superficie era presente una grande quantità di muco.

Tipo acuto. L'autopsia ha rivelato lesioni caratteristiche nell'intestino, soprattutto nei segmenti medio e inferiore dell'intestino tenue, in particolare nei segmenti intestinali vicini alla regione ileocecale e al peduncolo del sacco vitellino, che erano evidentemente ingranditi, raggiungendo spesso un volume da 3 a 4 volte superiore a quello di un segmento intestinale normale, ed erano a forma di salsiccia e sodi al tatto. Dopo aver tagliato la parete intestinale nella parte sporgente, si è riscontrato che la parete intestinale era diventata più sottile e tesa e che nella cavità intestinale erano presenti emboli coagulati di colore giallo chiaro o bianco-grigiastro chiaro. Erano composti da essudato fibrinoso coagulato e tessuto mucoso intestinale necrotico, che causavano il blocco completo della cavità intestinale.

Tipo subacuto. L'autopsia mostra principalmente un'enterite catarrale acuta, con fegato di colore giallo-rosso o rosso-viola scuro e ingrossato, cistifellea notevolmente ingrossata e contenente una grande quantità di bile verde scuro; la milza e il pancreas sono congestionati e talvolta si notano macchie necrotiche grigio-bianche.

3 Tecniche diagnostiche di laboratorio 3.1 Tecniche diagnostiche sierologiche Test di neutralizzazione del virus. Il principio di base è la reazione antigene-anticorpo, ovvero, dopo che l'anticorpo corrispondente si è legato al sito chiave del virus, non può più adsorbirsi e infettare normalmente e quindi non può causare un effetto citopatico (CPE). Questo è il metodo diagnostico sierologico più comunemente utilizzato.

Saggio immunoenzimatico (ELISA). Questo metodo è attualmente una delle tecnologie di rilevamento più comunemente utilizzate nel campo della biologia ed è stato gradualmente utilizzato come mezzo di routine per rilevare agenti patogeni prevalenti negli animali. Questa tecnologia presenta i vantaggi di un'elevata sicurezza, semplicità d'uso, elevata sensibilità e rapidità dei risultati. I metodi più comunemente utilizzati includono l'ELISA a doppio sandwich e l'ELISA spot. Di solito, per fare una diagnosi bastano solo 3 o 4 ore, il che è adatto per una diagnosi precoce nelle oche. Tuttavia, poiché questa tecnologia richiede la preparazione di anticorpi monoclonali, la sua promozione clinica nelle cliniche veterinarie primarie è soggetta ad alcune limitazioni.

Metodo diagnostico mediante immunofluorescenza. Il metodo comprende il metodo della fluorescenza diretta e il metodo della fluorescenza indiretta. Tra questi, il metodo di ispezione più comunemente utilizzato in laboratorio è quello della fluorescenza diretta. Si riferisce alla marcatura di pigmenti fluorescenti su anticorpi o antigeni e al loro utilizzo per la reazione antigene-anticorpo. È caratterizzato da elevata sensibilità, buona specificità e tempi di esecuzione rapidi. Tuttavia, a causa del problema della colorazione aspecifica, i risultati del giudizio sono relativamente soggettivi. Il metodo dell'immunofluorescenza indiretta consiste nel suddividere il materiale malato da testare in pezzi o fette, quindi aggiungere rispettivamente sieri anti-GPV negativi e positivi standard e infine aggiungere anticorpi secondari marcati con fluorescenza per lo sviluppo del colore, ma richiede l'uso di un microscopio a fluorescenza.

Tecnologia immunocromatografica con oro colloidale. Questa tecnologia è stata applicata in molti aspetti dei test. I suoi vantaggi sono la semplicità d'uso, l'assenza di strumenti complessi, l'elevata specificità, l'elevata sensibilità e i risultati dei test intuitivi.

3.2 Tecnologia di rilevamento della biologia molecolare: tecnologia PCR. Questa tecnologia è il metodo di rilevamento più sensibile tra le varie tecnologie di diagnosi virologica attualmente disponibili. I suoi vantaggi sono la buona specificità e la capacità di rilevare un gran numero di campioni contemporaneamente, senza dover isolare e purificare il virus.

Tecnica di ibridazione in situ. Questa tecnologia utilizza una sonda di DNA GPVSS marcata con digossina per rilevare il parvovirus dell'oca. Questo perché la sonda può reagire positivamente solo con l'acido nucleico del virus, ma non reagirà con il liquido allantoico dell'embrione d'oca, il tessuto normale dell'embrione d'oca, il fegato d'oca e altri tessuti. Pertanto presenta un'altissima sensibilità e una forte specificità. Inoltre, questa tecnologia è in grado di rilevare con precisione e rapidità la presenza dell'acido nucleico del parvovirus dell'oca con elevata ripetibilità.

Tecnica di amplificazione isotermica circolare. Il punto chiave di questa tecnologia è progettare 4 primer specifici per le 6 regioni del frammento target e amplificare in modo efficiente il frammento target con l'aiuto della DNA polimerasi a spostamento di catena in condizioni di temperatura costante di circa 65°C. I suoi vantaggi sono la semplicità d'uso, l'elevata sensibilità, la forte specificità e il breve tempo di consumo. Non richiede strumenti costosi e per completare l'operazione è sufficiente un bagno d'acqua. Di solito è applicabile alla diagnosi di laboratorio nei dipartimenti veterinari di base e alla diagnosi clinica sul campo.

4 Misure di prevenzione e controllo 4.1 Gestione delle epidemie Le oche malate devono essere isolate immediatamente dopo la scoperta. Le oche morte devono essere sepolte in profondità. Per prima cosa pulire la casa delle oche, quindi risciacquarla con acqua ad alta pressione e infine spruzzarla con una soluzione di idrossido di sodio al 2% per disinfettarla. Contemporaneamente, immergere le mangiatoie e gli abbeveratoi in una soluzione di permanganato di potassio all'1% per disinfettarli. Le oche dovrebbero inoltre essere disinfettate almeno 3 volte a settimana per 2 settimane.

Per i paperotti non malati, è possibile iniettare per via sottocutanea 0,5-0,8 ml di antisiero ad alto titolo o 1,0 ml di anticorpo raffinato del tuorlo d'uovo per ogni paperotto. Si noti che è possibile aggiungere una quantità appropriata di antibiotici ad ampio spettro all'anticorpo del siero o del tuorlo d'uovo. Per i paperotti malati, è possibile iniettare per via sottocutanea 1,0 ml di antisiero ad alto titolo o 1,5 ml di anticorpo raffinato del tuorlo d'uovo per ogni paperotto. Allo stesso tempo, è possibile aggiungere 4 g di bevanda multivitaminica elettrolitica per ogni chilogrammo di acqua potabile. Ciò può aumentare il tasso di guarigione e ridurre l'insorgenza di stress.

4.2 Vaccinazione Attualmente, il modo principale per prevenire l'insorgenza di questa malattia è immunizzare le oche con il vaccino contro il parvovirus dell'oca. Possono essere utilizzati sia vaccini vivi che inattivati. Tra questi, il vaccino inattivato presenta i vantaggi della sicurezza, della facile conservazione e del lungo periodo di immunità, ed è adatto all'applicazione clinica.

Programma di immunizzazione consigliato: le oche riproduttrici devono ricevere la prima vaccinazione 20 giorni prima della deposizione e la seconda vaccinazione a 120 giorni di età, somministrando a ogni paperotto 1 ml di vaccino ogni volta; i paperotti devono ricevere la prima vaccinazione a 3 giorni di età, con 0,5 ml di vaccino per ogni paperotto, e la seconda vaccinazione a 90 giorni di età, con 1,0 ml di vaccino per ogni paperotto. Per i paperotti privi di anticorpi materni, poiché ci sarà un periodo di assenza di anticorpi, è meglio usare anticorpi del siero o del tuorlo altamente immuni dopo la schiusa per prevenire la malattia.